А.С. Геогджаян1, А.Г. Кошкидько2, И.В. Жарникова3, Е.В. Жданова4, О.А. Гнусарева5, Д.В. Русанова6, А.М. Жиров7, М.М. Курноскина8, О.В. Васильева9, Т.В. Жарникова10, А.Д. Беседин11

1–11 Федеральное казенное учреждение здравоохранения
«Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт»
Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей
и благополучия человека (г. Ставрополь, Россия)

2 koshkidko-94@mail.ru, 3 IVJ-biotech@yandex.ru

Постановка проблемы. Туляремия – природно-очаговая зоонозная инфекция, природные очаги которой широко распространены на большей части территории Российской Федерации. Возбудитель туляремии – Francisella tularensis – обладает высокой патогенностью для человека, что определяет место данного возбудителя в высшей категории А, среди наиболее опасных патогенных микроорганизмов потенциальных агентов биологического оружия и средств биотерроризма. В связи с этим важное значение имеют методы лабораторной диагностики туляремии и индикации её возбудителя, позволяющие своевременно выяснить причину эпидемических осложнений и провести противоэпидемические мероприятия.

Цель работы – оценка применения магноиммуносорбентов в иммуноферментном анализе и лиофилизированного эритроцитарного диагностикума в реакции непрямой гемагглютинации при индикации возбудителя туляремии в объектах окружающей среды.

Результаты. Иммуноферментный анализ с магноиммуносорбцией и реакция непрямой гемагглютинации обладают достаточной чувствительностью, просты в использовании при осуществлении индикации возбудителя туляремии. Проведенные испытания применения магноиммуносорбентов в иммуноферментном анализе и диагностического эритроцитарного набора показали возможность индикации возбудителя туляремии в объектах окружающей среды с подтвержденными данными в полимеразной цепной реакции.

Практическая значимость. Доказана эффективность применения разработанных препаратов при выявлении возбудителя туляремии в объектах окружающей среды.

1. Maurin M. Francisella tularensis, Tularemia and Serological Diagnosis // Front. Cell Infect. Microbiol. 2020. № 10. P. 512090. https://doi.org/10.3389/fcimb.2020.512090
2. Кузнецова Е.М., Шепелёв И.А., Волох О.А. Структурно-функциональная характеристика основных антигенов Francisella tularensis // Проблемы особо опасных инфекций. 2009. № 2 (100). С. 44–49. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2009-2(100)-44-49
3. Rega P., Guinness M., McMahon C. Tularemia – A Review with Concern for Bioterrorism // Medical Research Archives. 2017. V. 5. № 8. P. 1–15.
4. Ираклионова Н.С., Сысуев Е.Б., Мась Е.С. Природные очаги опасных и особо опасных возбудителей инфекционных заболеваний. Туляремия // Успехи современного естествознания. 2013. № 9. С. 118–119.
5. Демидова Т.Н., Алешо Н.А., Михайлова Т.В., Семихин А.С. Туляремия: учебное пособие. М.: ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России. 2020. 102 с.
6. Yanes H., Hennebique A., Pelloux I., Boisset S., Bicout D.J., Caspar Y., Maurin M. Evaluation of In-House and Commercial Serological Tests for Diagnosis of Human Tularemia // Clin. Microbiol. 2017. V. 56 (1). P. e01440-17. https://doi.org/10.1128/jcm.01440-17
7. Тюменцева И.С., Жарникова И.В., Афанасьев Е.Н., Ефременко В.И., Коготкова О.И., Кальной С.М., Куличенко А.Н. Научно-методические разработки биотехнологий производства иммунобиологических препаратов для экспресс-диагностики инфекционных заболеваний и детекции их возбудителей // БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2015. № 4 (56). С. 21–25.
8. Жарникова И.В., Ефременко В.И., Жарникова Т.В., Курчева С.А., Кальной С.М., Ефременко Д.В., Исакова А.А., Инденбом А.В. Серологические методы выявления возбудителя туляремии и их оценка // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2019. № 4. С. 32–38.
9. Геогджаян А.С., Жарникова Т.В., Курчева С.А., Котенева Е.А., Гнусарева О.А., Котенев Е.С., Калинин А.В., Кошкидько А.Г., Русанова Д.В. Способ получения магнитных иммуносорбентов для селективного концентрирования F. tularensis из объектов окружающей среды с последующей детекцией методом MALDI-TOF MS: Пат. 2756202 РФ C12N 1/00, C12N 11/14, G01N 33/531, G01N 33/569, A61K 39/02; заявл. 07.12.2020; опубл. 28.09.2021, Бюл. № 28. 7 с.
10. Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labelled antibody-a new method of conjugation // J. Histochem. Cytochem. 1974. V. 22. № 4. P. 506–508. https://doi.org/10.1177/22.12.1084
11. Тюменцева И.С., Афанасьев Е.Н., Старцева О.Л., Курчева С.А., Жарникова И.В., Гаркуша Ю.Ю., Жданова Е.В., Кальной С.М. Разработка стандартных условий биотехнологии производства иммуномагнитного сорбента для экспресс-диагностики опасных инфекционных заболеваний // Технологии живых систем. 2017. № 2. С. 52–58.
12. Тюменцева И.С., Курчева С.А., Афанасьев Е.Н., Жарникова И.В., Жданова Е.В., Старцева О.Е., Гаркуша Ю.Ю., Семирчева А.А. Особенности пробоподготовки с использованием иммуномагнитного сорбента при исследовании полевого материала на наличие возбудителя чумы // Военно-медицинский журнал. 2018. № 339 (5). С. 42–46.
13. Жарникова И.В., Кошкидько А.Г., Курчева С.А., Жданова Е.В., Старцева О.Л., Тюменцева И.С., Афанасьев Е.Н., Семирчева А.А., Геогджаян А.С., Красовская Т.Л. Способ приготовления эритроцитарного диагностикума иммуноглобулинового туляремийного: Пат. 2747420 РФ G01N 33/531; заявл. 17.07.2020; опубл. 04.05.2021, Бюл. № 13. 10 с.
14. Жарникова И.В., Курчева С.А., Жданова Е.В., Тюменцева И.С., Афанасьев Е.Н., Жарникова Т.В., Старцева О.Л., Кошкидько А.Г., Геогджаян А.С., Гаркуша Ю.Ю. Универсальная среда высушивания для стабилизации эритроцитарных диагностикумов туляремийных: Пат. 2708636 РФ G01N 33/531; заявл. 30.07.2019; опубл. 10.12.2019, Бюл. № 34. 7 с.
15. Кошкидько А.Г., Жарникова И.В., Курчева С.А., Жданова Е.В., Семирчева А.А., Геогджаян А.С., Жарникова Т.В., Старцева О.Л., Богданова Ю.В. Способ лиофилизации эритроцитарных диагностикумов туляремийных: Пат. 2749355 РФ G01N 33/531; заявл. 17.07.2020; опубл. 09.06.2021, Бюл. № 16. 9 с.
16. ГОСТ Р 51352-2013. Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний. М.: Стандартинформ. 2014. 23 с.
17. ОФС.1.4.1.0031. Лиофилизаты. Государственная фармакопея Российской Федерации. М.: Стандартинформ. 2023. 6 с.
18. ОФС.1.2.1.0010. Потеря в массе при высушивании. Государственная фармакопея Российской Федерации. М.: Стандартинформ. 2023. 2 с.
19. ГОСТ Р 53022.2-2008. Технологии лабораторные клинические. Требования к качеству клинических лабораторных исследований. Часть 2. Оценка аналитической надежности методов исследования (точность, чувствительность, специфичность). М.: Стандартинформ. 2009. 28 с.
20. СанПиН 3.3686-21. Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней. Министерство юстиции Российской Федерации. 2021. 1092 с.
21. ГОСТ Р 53022.3-2008. Технологии лабораторные клинические. Требования к качеству клинических лабораторных исследований. Часть 3. Правила оценки клинической информативности лабораторных тестов.  М.: Стандартинформ. 2009. 18 с.