М.Г. Холявка - к.б.н., науч. сотрудник, кафедра биофизики и биотехнологии, Воронежский государственный университет. E-mail: holyavka@rambler.ru В.Г. Артюхов - д.б.н., профессор, зав. кафедрой биофизики и биотехнологии, Воронежский государственный университет Т.А. Ковалева - д.б.н., профессор, кафедра биофизики и биотехнологии, Воронежский государственный университет. E-mail: tamara_kovaleva@inbox.ru

Показано, что инулиназа из Aspergillus awamori BKMF 2250 является гетеродимером. Определены кажущиеся молекулярные массы субъединиц белка (76,9 и 10,1 кДа) и их каталитическая активность. Анализ ИК-спектров инулиназы и ее субъединиц позволил выдвинуть предположение о том, что четвертичная структура фермента поддерживается преимущественно гидрофобными взаимодействиями.

1. Alberto F., Bignon C., Sulzenbacher G., Henrissat B., Czjzek M.The three-dimensional crystal structure of invertase (β-fructosidase) from Thermotoga maritima reveals a bimodular arrangement and an evolutionary relationship between retaining and inverting glycosidases // J. Biol. Chem. 2004. V. 279. P. 18903-18910.
2. Alberto F., Jordi E., Henrissat B., Czjzek M.Crystal structure of inactivated Thermotoga maritima invertase in complex with the trisaccharide substrate raffinose // Biocherm. J. 2006. V. 395. P. 457-462.
3. Arand M., Golubev A.M., Neto J.R.B., Polikarpov I., Wattiez R., Korneeva O.S., Eneyskaya E.V., Kulminskaya A.A., Shabalin K.A., Shishliannikov S.M., Chepurnaya O.V., Neustroev K.N. Purification, characterization, gene cloning and preliminary X-ray data of the exo-inulinase from Aspergillus awamori// Biocherm. J. 2002. V. 362. P. 131-135.
4. Nagem R.A.P., Rojas A.L., Golubev A.M., Korneeva O.S., Eneyskaya E.V., Kulminskaya A.A., Neustroev K.N., Polikarpov I.Crystal structure of exoinulinase from Aspergillus awamori: the enzyme fold and structural determinants of substrate recognition // J. Mol. Biol. 2004. V. 344. P. 471-480.
5. Verhaest M., Ende W.V., Roy K.L., Ranter C.J.D., Laere A.V., Rabijns A.X-ray diffraction structure of a plant glycosyl hydrolase family 32 protein: fructan 1-exohydrolase IIa of Cichorium intybus// The Plant Journal. 2005. V. 41. P. 400-411.
6. Скрипкин А.Ю., Волынская А.В., Шишков А.В. Исследование механизма связывания додецилсульфата натрия лизоцимом // Молекулярная биология. 1981. Т. 15. С. 1364-1370.
7. Kubo K. Takagi T. Modulation of the behavior of a protein in polyacrilamide electrophoresis in the presence of dodecyl sulfafebly varying the cations // Anal. Biothem. 1995. V. 224. № 2. P. 572-579.
8. Артюхов В.Г., Наквасина М.А. Биологические мембраны: структурная организация, модификация физико-химичес­кими агентами: учебное пособие. Воронеж: издательство ВГУ. 2000. 296 с.
9. Ковалева Т.А., Холявка М.Г. Исследование структурных особенностей инулиназ из различных продуцентов методом ИК-спектрофотометрии // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2011. № 1. С. 3-7.
10. Ермаков А.И., Арасимович В.В., Ярош Н.П. Методы биохимического исследования растений // Л.: Агропромиздат. 1987. 429 с.