The simple hplc analysis of glutathione in red blood cells

А.А. Дутов; Д.А. Никитин; П.П. Терешков; А.В. Мартынова; А.В. Сверкунова; А.В. Ермолина; Ю.Л. Лукьянова; Н.А. Шемякина

The simple hplc analysis of glutathione in red blood cells

А.А. Дутов¹, Д.А. Никитин², П.П. Терешков³, А.В. Мартынова⁴, А.В. Сверкунова⁵, А.В. Ермолина⁶, Ю.Л. Лукьянова⁷, Н.А. Шемякина⁸

research article Pages: 12-15

¹ д.м.н., ст. науч. сотрудник, лаборатория экспериментальной и клинической биохимии и иммунологии, НИИ молекулярной медицины, Читинская государственная медицинская академия
² зав. лабораторией химического анализа, Забайкальский государственный университет (г. Чита)
³ к.м.н., врач 1-й квалификационной категории, ст. науч. сотрудник, зав. лабораторией экспериментальной и клинической биохимии и иммунологии, НИИ молекулярной медицины, Читинская государственная медицинская академия
^4,5 аспирант, кафедра химии, Забайкальский государственный университет (г. Чита)
⁶ врач-офтальмолог, Краевая больница № 2 (г. Чита)
⁷ врач-ординатор, кафедра неврологии, Читинская государственная медицинская академия
⁸ ассистент, кафедра общей хирургии, Читинская государственная медицинская академия

Keywords: glutathione HPLC red blood cells

Abstract

A simple HPLC method for measuring of the total and free glutathione in red blood cells was validated. Reduction from disulfides was achieved with 1,4-dithioerythritol. Aminothiols derivatization was made with 5,5\'-dithio-bis-(2-nitrobenzoic acid). A derivative separated by means of is reversed-phase (С18) HPLC and UV detection at 330 nm. Simplicity and reproducibility of a method, allow its use in a clinical practice for an estimation of biochemical changes at various diseases.

How to cite

Дутов А.А., Никитин Д.А., Терешков П.П., Мартынова А.В., Сверкунова А.В., Ермолина А.В., Лукьянова Ю.Л., Шемякина Н.А. Простой ВЭЖХ-анализ глутатиона в эритроцитах // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2015. № 6. С. 12–15.

References

Wu G., Fang Y.Z., Yang S., Lupton J.R., and Turner N.D.Glutathione Metabolism and Its Implications for Health (review) // J. Nutr. 2004. V. 134. P. 489-492.
Griffith O. W.Biologic and pharmacologic regulation of mammalian glutathione synthesis // Free Radic. Biol. Med. 1999. V. 27. P. 922-935.
Jones D. P.Redox potential of GSH/GSSG couple: assay and biological significance // Methods Enzymol. 2002. V. 348. P. 93-112.
Mansoor M. A., Bergmark C., Svardal A. M., Lonning P. E. and Ueland P. M. Redox status and protein binding of plasma homocysteine and other aminothiols in patients with early-onset peripheral vascular disease //Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 1995. V. 15. P. 232-240.
Reid M., Badaloo A., Forrester T. and Jahoor F. In vivo rates of erythrocyte glutathione synthesis in adults with sickle cell disease // Am J. Physiol Endocrinol Metab. 2006. V. 291. P. 73-79.
Hirono A., Iyori H., Sekine I., Ueyama J., Chiba H., Kanno H., Fujii H. and Miwa S. Three Cases of Hereditary Nonspherocytic Hemolytic Anemia Associated With Red Blood Cell Glutathione Deficiency // Blood. 1996. V. 87. № 5. P. 2071-2074.
George Lynn and Louise C. Hellwig. Handbook of derivatization reactions for HPLC // John Wiley & Sons. Inc. 1998.
Doson R., EHlliot D., EHlliot U., Dzhons K. Spravochnik biokhimika: per. s angl. M. Mir. 1991.

[1] Wu G., Fang Y.Z., Yang S., Lupton J.R., and Turner N.D.Glutathione Metabolism and Its Implications for Health (review) // J. Nutr. 2004. V. 134. P. 489-492.

[2] Griffith O. W.Biologic and pharmacologic regulation of mammalian glutathione synthesis // Free Radic. Biol. Med. 1999. V. 27. P. 922-935.

[3] Jones D. P.Redox potential of GSH/GSSG couple: assay and biological significance // Methods Enzymol. 2002. V. 348. P. 93-112.

[4] Mansoor M. A., Bergmark C., Svardal A. M., Lonning P. E. and Ueland P. M. Redox status and protein binding of plasma homocysteine and other aminothiols in patients with early-onset peripheral vascular disease //Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 1995. V. 15. P. 232-240.

[5] Reid M., Badaloo A., Forrester T. and Jahoor F. In vivo rates of erythrocyte glutathione synthesis in adults with sickle cell disease // Am J. Physiol Endocrinol Metab. 2006. V. 291. P. 73-79.

[6] Hirono A., Iyori H., Sekine I., Ueyama J., Chiba H., Kanno H., Fujii H. and Miwa S. Three Cases of Hereditary Nonspherocytic Hemolytic Anemia Associated With Red Blood Cell Glutathione Deficiency // Blood. 1996. V. 87. № 5. P. 2071-2074.

[7] George Lynn and Louise C. Hellwig. Handbook of derivatization reactions for HPLC // John Wiley & Sons. Inc. 1998.

[8] Doson R., EHlliot D., EHlliot U., Dzhons K. Spravochnik biokhimika: per. s angl. M. Mir. 1991.

Abstract

How to cite

Related articles